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Article ANNEXE II AUTONOME ABROGE, en vigueur du au (Arrêté du 27 décembre 1994 relatif au dossier de demande d'agrément prévu au titre Ier du décret no 93-773 du 27 mars 1993)

Article ANNEXE II AUTONOME ABROGE, en vigueur du au (Arrêté du 27 décembre 1994 relatif au dossier de demande d'agrément prévu au titre Ier du décret no 93-773 du 27 mars 1993)

I. - Renseignements relatifs au projet d'utilisation

1. Titre du projet.

2. Description des objectifs.

3. Nom des services impliqués dans les études cliniques.

4. Nom, prénoms et formation des personnels hospitaliers impliqués.

5. Description de la physiopathologie de la maladie.

6. Stratégie de thérapie génique proposée :

- système de transfert ;

- gène transféré.

7. Efficacité thérapeutique attendue en fonction des résultats des expérimentations réalisées sur l'animal ou données justifiant l'essai direct chez l'homme.

8. Effets délétères potentiels.

9. Plan de l'étude clinique.

10. Autres traitements administrés en parallèle.

11. Evaluation des effets.

12. Evaluation de la pathogénicité du traitement pour le malade et pour l'entourage.

13. Coordonnées du comité consultatif de protection des personnes dans la recherche biomédicale compétent.

II. - Renseignements relatifs au matériel biologique utilisé

Si le matériel biologique utilisé provient d'un laboratoire différent de celui du demandeur, la référence du dossier déposé à la commission de génie génétique par le laboratoire public ou privé fournissant le matériel doit être indiquée. Si aucun classement n'a été délivré ou si le laboratoire producteur est étranger, les caractéristiques exactes de ce matériel et toutes les références utiles le concernant doivent être fournies à la commission, y compris dans le cas d'un produit commercialisé.

A. - Thérapie génique par autogreffe de cellules

génétiquement modifiées à l'aide de vecteurs viraux

1. Description des populations cellulaires réceptrices :

Prélèvement, culture, conservation ;

Homogénéité des populations cellulaires avant et après transfert de gènes ;

Phénotype des cellules après transfert ;

Recherche de pathogènes dans les cellules à greffer.

2. Description du gène transféré :

Carte détaillée du gène transféré ;

Séquences régulatrices et codantes ;

Evaluation de la pathogénicité propre du gène transféré.

3. Description du vecteur de transfert dans les cellules :

Carte détaillée du vecteur ;

Référence de la construction du vecteur et description ;

Evaluation de la pathogénicité résiduelle du vecteur ;

Mode de production :

- description des cellules productrices ;

- les cellules ont-elles été validées pour la préparation de vaccins ?

- produisent-elles du virus sauvage de même espèce que le vecteur ?

- produisent-elles d'autres particules virales potentiellement pathogènes ?

- quelles méthodes ont été utilisées pour analyser ces différents points ?

- date la plus récente de la caractérisation phénotypique de la lignée productrice et de la recherche de pathogènes.

Mode d'infection :

a) Dans le cas de suspension virale :

- quel est le mode de préparation et le titre ?

- persiste-t-il des débris cellulaires ?

b) Dans le cas de coculture entre cellules productrices et cellules à corriger par transfert de gène :

- quel est le mode de séparation des deux populations cellulaires ?

- persiste-t-il des débris cellulaires ?

Données sur les risques de recombinaison avec d'autres virus, estimation du risque de reproduction de vecteurs recombinants non défectifs.

4. Niveaux d'expression et stabilité de l'expression du gène transféré ex vivo dans les cellules utilisées.

5. Statut du gène transféré : intégré, extrachromosomique, épisomique, fréquence des réarrangements, type de mutagenèse insertionnelle potentielle.

6. Procédé et localisation projetée pour l'autogreffe.

7. Conformité des locaux (en l'état actuel des connaissances, chambre TL 2) où sera réalisée l'autogreffe.

8. Contrôles prévus avant la sortie du patient hors du secteur TL 2.

9. Contrôles prévus à long terme. Evaluation du risque pour l'entourage et l'environnement des malades dans le cas où une production de virus recombinés est possible.

B. - Transfert direct de vecteurs viraux dans l'organisme

1. Description du gène transféré :

Séquences régulatrices et codantes ;

Evaluation de la pathogénicité propre du gène transféré.

2. Description du vecteur de transfert dans les cellules :

Référence de la construction du vecteur et description ;

Evaluation de la pathogénicité résiduelle du vecteur.

Mode de production :

- description des cellules productrices ;

- ont-elles été validées pour la préparation de vaccin ?

- produisent-elles du virus sauvage de même espèce que le vecteur ?

- produisent-elles d'autres particules virales potentiellement pathogènes ?

- quelles méthodes ont été utilisées pour analyser ces différents points ?

- date la plus récente de la caractérisation phénotypique de la lignée productrice et de la recherche de pathogènes.

Mode de préparation de la suspension virale, titre, présence de débris cellulaires.

Données sur les risques de recombinaisons avec d'autres virus, estimation du risque de production de vecteurs recombinants non défectifs.

3. Niveaux d'expression et stabilité de l'expression dans les cellules infectées.

4. Statut du gène transféré : intégré, extra-chromosomique, épisomique, fréquence des réarrangements, type de mutagénèse insertionnelle potentielle.

5. Méthodes d'étude du statut immunologique et virologique des malades à traiter.

6. Voies d'administration : I.V., I.M., per os, nébulisation, dérivation circulatoire.

7. Estimation des risques de dissémination, particulièrement des risques d'infection du personnel soignant et de laboratoire.

8. Description des mesures de protection du personnel soignant et de laboratoire, ainsi que des contrôles effectués sur ce personnel avant et après administration du traitement.

9. Localisation attendue de l'ADN viral.

10. Conformité des locaux (en l'état actuel des connaissances, chambres de type TL 2 ou TL 3 pour les thérapies utilisant un adénovirus, en fonction du gène transféré).

11. Description du suivi à court terme après injection et description des paramètres dont dépendra le temps d'isolement en secteur TL 2 ou TL 3.

12. Suivi à long terme : évaluation du risque de production, de pseudotypes viraux ou de virus recombinants en cas d'infection intercurrente par des virus " sauvages ", tests effectués, évaluation du risque pour l'entourage et l'environnement des malades.