Les hématies-tests utilisées pour le groupage ABO et la recherche des anticorps anti-érythrocytaires doivent faire l'objet d'une validation interne et de contrôles quotidiens dont les modalités dépendent de leur origine et de leurs conditions d'utilisation.
VII.2.2.1. Hématies-tests utilisées pour le groupage ABO
VII.2.2.1.1. Validation interne :
Lorsque les hématies tests sont fournies par un distributeur et utilisées sans traitement secondaire, la validation interne n'est pas nécessaire.
Si les hématies-tests sont fournies par un distributeur et utilisées après un traitement secondaire, une procédure décrit le mode de préparation de chaque lot à partir du lot fournisseur. La validation interne consiste alors à valider la préparation.
Si les hématies-tests sont préparées par l'utilisateur, une procédure décrit le mode de préparation et la définition de chaque lot d'hématies-tests. Le mode de préparation doit être validé de façon à garantir :
- le groupage ABO ;
- la conservation de la réactivité des antigènes dans la préparation primaire et secondaire durant toute la période d'utilisation préconisée ;
- l'absence de prolifération bactérienne pendant la durée de conservation prévue.
Chaque lot d'hématies-tests doit faire l'objet d'un dossier récapitulatif comprenant notamment :
- la dénomination du produit ;
- le numéro de don s'il y a lieu ;
- la détermination du groupe ABO ;
- le nom du distributeur et du producteur s'il y a lieu ;
- le numéro de lot du distributeur s'il y a lieu ;
- la date de péremption ;
- les modalités techniques de préparation et les résultats de validation interne si nécessaire ;
- les noms et signatures du technicien et du responsable de laboratoire ayant validé le dossier.
VII.2.2.1.2.Contrôles quotidiens :
Pour chaque série d'analyses, les hématies-tests utilisées doivent faire l'objet d'une recherche des antigènes A et B effectuée à l'aide des réactifs anti-A, anti-B, et anti-A, B. L'intensité est appréciée en fonction de la technique utilisée.
VII.2.2.2. Hématies-tests et réactifs utilisés pour la recherche des anticorps anti-érythrocytaires autres que ceux du groupe ABO et conditions d'utilisation
VII.2.2.2.1. Validation interne :
Les techniques, matériels, réactifs utilisés pour la recherche des anticorps anti-érythrocytaires autres que ceux du groupe ABO doivent faire l'objet d'une validation dont les modalités dépendent des conditions techniques de l'analyse.
Lorsque les analyses sont réalisées dans les conditions techniques préconisées par le distributeur, cette validation interne peut être restreinte. Elle consiste à apprécier les titres et éventuellement les scores, en dilutions de raison 2, d'un anticorps puissant de spécificité anti-D (RH 1) et d'un anticorps faible par un test indirect à l'antiglobuline.
Lorsque les analyses sont réalisées dans les conditions techniques différentes de celles préconisées par le distributeur, la validation doit porter sur les paramètres suivants selon la technique utilisée :
- la spécificité ;
- la puissance : intensité et titres obtenus dans ces conditions techniques, par comparaison avec les résultats obtenus par un test indirect à l'antiglobuline :
(Tableau non reproduit)
Les résultats de validation des techniques et réactifs utilisés pour la recherche des anticorps anti-érythrocytaires autres que ceux du groupe ABO doivent figurer dans un dossier précisant :
- la dénomination des matériels et réactifs ;
- le nom du ou des distributeurs de matériels et réactifs ;
- le ou les numéros de lot des réactifs. Le ou les numéros des clones si un ou des réactifs monoclonaux rentrent dans la composition des réactifs ;
- le ou les numéros de conformité du Centre national de référence pour les groupes sanguins ;
- les modalités techniques de réalisation de l'examen ;
- les dates de péremption des réactifs ;
- le(s) nom(s) et la (les) signatures du ou des techniciens ayant réalisé les contrôles ;
- le nom et la signature du responsable de laboratoire ayant validé le dossier.
Lorsque les hématies-tests sont préparées par l'utilisateur, une procédure décrit le mode de préparation et la définition de chaque lot d'hématies-tests. Le mode de préparation doit être validé de façon à garantir :
- le phénotype érythrocytaire ;
- la négativité du test direct à l'antiglobuline réalisé à l'aide d'antiglobulines polyspécifiques anti-Ig G et anti-complément ;
- la conservation de la réactivité des antigènes dans la préparation primaire et secondaire durant toute la période d'utilisation préconisée ;
- l'absence de prolifération bactérienne pendant la durée de conservation prévue.
Chaque lot d'hématies-tests préparé par l'utilisateur doit faire l'objet d'un dossier récapitulatif comprenant notamment :
- la dénomination du produit ;
- le numéro de don s'il y a lieu ;
- l'identification du phénotype ;
- la date de péremption ;
- les modalités techniques de préparation et les résultats de validation interne ;
- les noms et signatures du technicien et du responsable de laboratoire ayant validé le dossier.
VII.2.2.2.2. Contrôles quotidiens :
Pour la recherche des anticorps anti-érythrocytaires, chaque série d'analyses doit être accompagnée d'un témoin sérum négatif et de deux témoins sérums positifs, un de titre élevé, l'autre de titre faible. Ces témoins sont utilisés en début et en fin de série.