Article (Arrêté du 25 août 1997 portant additif no 38 à la Pharmacopée française (10e édition))
« Identification
« A. - Opérez par chromatographie sur couche mince (2.2.27) en utilisant une plaque recouverte d'un gel de silice approprié.
« Solution à examiner. Teinture mère de Foenum graecum à examiner.
« Solution témoin (a). Dissolvez 10 mg de rutine R dans l'alcool à 60 % V/V et complétez à 10 ml avec le même solvant.
« Solution témoin (b). Dissolvez 10 mg de quercitroside R dans l'alcool R et complétez à 10 ml avec le même solvant.
« Déposez séparément sur la plaque, en bandes, 20 ml de la solution à examiner et 10 ml de chacune des solutions témoins. Développez sur un parcours de 10 cm avec un mélange de 6 volumes d'eau, de 9 volumes de méthanol R, de 24 volumes d'acide acétique glacial R et de 45 volumes de chlorure de méthylène R. Laissez sécher la plaque à l'air. Examinez en lumière ultraviolette à 365 nm. Le chromatogramme obtenu avec la solution témoin (a) présente une bande de fluorescence brun-gris de Rf voisin de 0,40 et celui obtenu avec la solution témoin (b) une bande également de fluorescence brun-gris de Rf voisin de 0,65. Le chromatogramme obtenu avec la solution à examiner présente généralement une à deux bandes de fluorescence brun-rouge de Rf inférieur à celui de la bande du chromatogramme obtenu avec la solution témoin (a), une bande de fluorescence brun-gris de Rf voisin de celui de la bande obtenu avec la solution témoin (b), une bande de fluorescence brun-gris de Rf compris entre les Rf des bandes des chromatogrammes obtenus avec les solutions témoins (a) et (b) et, au-dessus, une bande de fluorescence bleue et une bande de fluorescence verte.
Pulvérisez une solution de diphénylborate d'aminoéthanol R à 10 g/l et de macrogol 400 R à 50 g/l dans le méthanol R. Examinez en lumière ultraviolette à 365 nm. Le chromatogramme obtenu avec la solution témoin (a) présente une bande de fluorescence orange de Rf voisin de 0,40 et celui obtenu avec la solution témoin (b) une bande également de fluorescence orange de Rf voisin de 0,65. Le chromatogramme obtenu avec la solution à examiner présente deux bandes de fluorescence jaune-vert de Rf inférieur à celui de la bande du chromatogramme obtenu avec la solution témoin (a), une bande de fluorescence orange de Rf compris entre les Rf des bandes des chromatogrammes obtenus avec les solutions témoins (a) et (b) et une bande de fluorescence jaune orangé de Rf voisin de celui de la bande du chromatogramme obtenu avec la solution témoin (b).
« B. - Opérez par chromatographie sur couche mince (2.2.27) en utilisant une plaque recouverte d'un gel de silice approprié.
« Solution à examiner. Teinture mère de Foenum graecum à examiner.
« Solution témoin. Dissolvez 10 mg de trigonelline monohydrate R dans l'alcool R et complétez à 10 ml avec le même solvant.
« Déposez séparément sur la plaque, en bandes, 20 ml de la solution à examiner et 10 ml de la solution témoin. Développez sur un parcours de 10 cm avec un mélange de 6 volumes d'eau, de 9 volumes de méthanol R, de 24 volumes d'acide acétique glacial R et de 45 volumes de chlorure de méthylène R.
Laissez sécher la plaque à l'air. Pulvérisez sur la plaque la solution d'iodobismuthate de potassium R diluée au 1/10 dans l'acide chlorhydrique dilué R2. Examinez à la lumière du jour. Le chromatogramme obtenu avec la solution à examiner présente dans le tiers inférieur une bande orange semblable quant à sa position et sa coloration à la bande du chromatogramme obtenu avec la solution témoin. Il peut également présenter une à deux bandes orange au-dessus.
« C. - Opérez par chromatographie sur couche mince (2.2.27) en utilisant une plaque recouverte d'un gel de silice approprié.
« Solution à examiner. A 5 ml de la teinture mère de Foenum graecum,
ajoutez 1 ml d'acide sulfurique R. Chauffez à reflux au bain-marie pendant 30 minutes. Après refroidissement, extrayez avec 3 fois 10 ml d'éther R. Séchez les phases éthérées sur du sulfate de sodium anhydre R puis évaporez-les sous pression réduite. Reprenez le résidu avec 1 ml de méthanol R.
« Solution témoin. Dissolvez 10 mg de diosgénine R dans le méthanol R et complétez à 10 ml avec le même solvant.
« Déposez séparément sur la plaque, en bandes, 20 ml de la solution à examiner et 10 ml de la solution témoin. Développez sur un parcours de 10 cm avec un mélange de 5 volumes de méthanol R et de 95 volumes de chlorure de méthylène R. Laissez sécher la plaque à l'air. Pulvérisez une solution d'acide sulfurique R à 100 g/l dans l'alcool R et chauffez à 100-105 oC pendant 10 minutes. Examinez en lumière ultraviolette à 365 nm. Le chromatogramme obtenu avec la solution à examiner présente une bande de fluorescence bleu-mauve de Rf voisin de 0,60 semblable quant à sa position et sa fluorescence à la bande du chromatogramme obtenu avec la solution témoin. Examinez à la lumière du jour. Cette bande apparaît colorée en rose violacé.