Article (Arrêté du 25 août 1997 portant additif no 38 à la Pharmacopée française (10e édition))
« Identification
« A. - Opérez par chromatographie sur couche mince (2.2.27) en utilisant une plaque recouverte d'un gel de silice approprié.
« Solution à examiner. Teinture mère de Glechoma hederacea à examiner.
« Solution témoin. Dissolvez 10 mg de rutine R, 10 mg d'acide chlorogénique R et 10 mg d'acide caféique R dans du méthanol R et complétez à 10 ml avec le même solvant.
« Déposez séparément sur la plaque, en bandes, 30 ml de la solution à examiner et 10 ml de la solution témoin. Développez sur un parcours de 10 cm avec un mélange de 10 volumes d'acide formique anhydre R, de 10 volumes d'eau, de 30 volumes de méthyléthylcétone R et de 50 volumes d'acétate d'éthyle R. Laissez sécher la plaque à l'air. Examinez en lumière ultraviolette à 365 nm. Le chromatogramme obtenu avec la solution témoin présente une bande de fluorescence brune de Rf voisin de 0,35 (rutine), deux bandes de fluorescence bleue à un Rf voisin de 0,50 (acide chlorogénique) et 0,95 (acide caféique). Le chromatogramme obtenu avec la solution à examiner présente une succession de bandes de fluorescence bleutée pâle sur toute sa longueur, dont les principales sont situées à un Rf voisin de 0,30, 0,55,
0,95 et une bande de fluorescence rouge orangé voisine du front du solvant.
Pulvérisez sur la plaque une solution de diphénylborate d'aminoéthanol R à 10 g/l et de macrogol 400 R à 50 g/l dans le méthanol R. Examinez en lumière ultraviolette à 365 nm. Le chromatogramme obtenu avec la solution témoin présente une bande de fluorescence orange de Rf voisin de 0,35 (rutine), une bande de fluorescence bleu-vert de Rf voisin de 0,50 (acide chlorogénique) et une bande de fluorescence verte de Rf voisin de 0,95 (acide caféique). Le chromatogramme obtenu avec la solution à examiner présente une bande de fluorescence verdâtre de Rf voisin de 0,25, une faible bande de fluorescence orangée de Rf voisin de 0,35 (rutine), une bande de fluorescence bleu-vert de Rf voisin de 0,50 (acide chlorogénique) et une bande de fluorescence verte de Rf voisin de 0,95 (acide caféique). Il peut apparaître dans la partie supérieure du chromatogramme, deux ou trois bandes de fluorescence orange ou verte (flavonoïdes).
« B. - Opérez par chromatographie sur couche mince (2.2.27) en utilisant une plaque recouverte d'un gel de silice approprié.
« Solution à examiner. Agitez 10 ml de teinture mère de Glechoma hederacea avec 3 fois 10 ml d'acétate d'éthyle R. Réunissez et filtrez les phases organiques sur du sulfate de sodium anhydre R, puis évaporez-les au bain-marie à siccité. Reprenez le résidu avec 1 ml de méthanol R.
« Solution témoin. Dissolvez 1 mg d'acide ursolique R dans du méthanol R et complétez à 10 ml avec le même solvant.
« Déposez séparément sur la plaque, en bandes, 10 ml de la solution à examiner et 5 ml de la solution témoin. Développez sur un parcours de 10 cm avec un mélange de 10 volumes d'acide formique anhydre R, de 40 volumes d'acétate d'éthyle R et de 50 volumes de chloroforme R. Laissez sécher la plaque à l'air. Pulvérisez une solution préparée avec 1 volume d'anhydride acétique R, 1 volume d'acide sulfurique R et 8 volumes d'alcool R, puis chauffez la plaque à 100-105 oC pendant 10 min à 15 min. Examinez à la lumière du jour. Le chromatogramme obtenu avec la solution à examiner présente une bande rose-violet de Rf voisin de 0,85 (acide ursolique) semblable quant à sa position et sa coloration à la bande du chromatogramme obtenu avec la solution témoin. Il présente également une à deux bandes gris-violet au-dessus de la ligne de dépôt, une succession de fines bandes ocre à violacées sur toute sa longueur et deux bandes orange à un Rf voisin de 0,90 et 0,95.