« Identification
« A. - Opérez par chromatographie sur couche mince (2.2.27) en utilisant une plaque recouverte d'un gel de silice approprié.
« Solution à examiner. Teinture mère de Juglans regia à examiner.
« Solution témoin. Dissolvez 10 mg d'hypéroside R et 10 mg de quercitroside R dans de l'alcool R et complétez à 10 ml avec le même solvant.
« Déposez séparément sur une plaque, en bandes, 20 ml de la solution à examiner et 10 ml de la solution témoin. Développez sur un parcours de 10 cm avec un mélange de 10 volumes d'acide formique anhydre R, de 10 volumes d'eau et de 80 volumes d'acétate d'éthyle R. Laissez sécher la plaque à l'air. Examinez en lumière ultraviolette à 365 nm. Le chromatogramme obtenu avec la solution à examiner présente deux bandes de fluorescence brune à un Rf voisin de 0,50 (hypéroside) et 0,70 (quercitroside) semblables quant à leur position et leur fluorescence aux bandes du chromatogramme obtenu avec la solution témoin. Il présente également une succession de bandes de fluorescence brune de Rf compris entre 0,60 et 0,90. Pulvérisez le réactif au diphénylborate d'aminoéthanol R et une solution de macrogol 400 R à 50 g/l dans du méthanol R. Examinez en lumière ultraviolette à 365 nm. Le chromatogramme obtenu avec la solution à examiner présente deux bandes de fluorescence orange vif à un Rf voisin de 0,50 (hyréposide) et 0,70 (quercitroside) semblables quant à leur position et leur fluorescence aux bandes du chromatogramme obtenu avec la solution témoin. Il présente également une succession de bandes de fluorescence orange de Rf compris entre 0,60 et 0,80 et une bande de fluorescence verte de Rf voisin de 0,85.
« B. - Opérez par chromatographie sur couche mince (2.2.27) en utilisant une plaque recouverte d'un gel de silice approprié.
« Solution à examiner. A 10 ml de teinture mère de Juglans regia, ajoutez 10 ml d'acide chlorhydrique dilué R et 2,5 ml de la solution de chlorure ferrique R1. Chauffez au bain-marie à reflux pendant 30 minutes. Laissez refroidir. Extrayez avec 2 fois 20 ml de pentane R. Filtrez les phases organiques puis évaporez sous pression réduite à 40 oC. Reprenez le résidu avec 1 ml d'alcool R.
« Solution témoin. Dissolvez 10 mg de juglone dans du méthanol R et complétez à 10 ml avec le même solvant.
« Déposez séparément sur la plaque, en bandes, 20 ml de la solution à examiner et 10 ml de la solution témoin. Développez sur un parcours de 10 cm avec un mélange de 1 volume d'acide formique anhydre R, de 25 volumes d'acétate d'éthyle R et de 75 volumes d'éther de pétrole R1. Laissez sécher la plaque à l'air. Pulvérisez la solution diluée d'hydroxyde de sodium R. Examinez à la lumière du jour. Le chromatogramme obtenu avec la solution à examiner présente une bande violette de Rf voisin de 0,70 semblable quant à sa position et sa coloration à la bande du chromatogramme obtenu avec la solution témoin.